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產(chǎn)品概述
QuikCyto® Rat TNF-α ELISA kit (Quick Test)
Rat
31.25pg/ml
62.5-4000pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
1.5h~2h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Rat TNF-α濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組Rat TNF-α
與以下細(xì)胞因子等無(wú)明顯交叉反應(yīng)：Human TNF-α，TNF-β，TNF RI，TNF RII；Mouse IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，TNF RI，TNF RII；Rat IL-1β，IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，IFN-γ，PDGF-BB
欣博盛ELISA快速檢測(cè)試劑盒采用雙抗體夾心法：抗大鼠TNF-α單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的大鼠TNF-α?xí)c單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗大鼠TNF-α抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗大鼠TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的大鼠TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有大鼠TNF-α，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，大鼠TNF-α濃度與OD450值之間呈正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中大鼠TNF-α的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱(chēng) | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 3.2 ng/支×2 支 | 3.2 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說(shuō)明/保質(zhì)期
| 未開(kāi)封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開(kāi)封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開(kāi)封試劑盒效期特指試劑開(kāi)蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開(kāi)封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。
相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.074 | 0.068 | 0.071 | |
| 62.5 | 0.118 | 0.114 | 0.116 | 0.045 |
| 125 | 0.164 | 0.166 | 0.165 | 0.094 |
| 250 | 0.257 | 0.259 | 0.258 | 0.187 |
| 500 | 0.474 | 0.477 | 0.476 | 0.405 |
| 1000 | 0.791 | 0.794 | 0.793 | 0.722 |
| 2000 | 1.423 | 1.427 | 1.425 | 1.354 |
| 4000 | 2.587 | 2.590 | 2.589 | 2.518 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中大鼠TNF-α的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（pg/ml） | 2310.6 | 942.5 | 320.4 | 2110.5 | 920.3 | 308.7 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 175.61 | 69.75 | 24.03 | 170.95 | 71.78 | 24.08 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.6 | 7.4 | 7.5 | 8.1 | 7.8 | 7.8 |
科研工具箱
別稱(chēng)
Tnfa; RATTNF; TNF-alpha
基因ID
Gene ID: 24835
功能
腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor alpha, TNF-α)也稱(chēng)為惡病質(zhì)素(cachectin)和TNFSF1A，是一種多效性的細(xì)胞因子，在炎癥、細(xì)胞凋亡和免疫系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要作用。TNF-α可由多種免疫細(xì)胞和上皮細(xì)胞產(chǎn)生。大鼠TNF-α由35個(gè)氨基酸氨基的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、21個(gè)氨基酸殘基的跨膜區(qū)以及179個(gè)氨基酸組成的胞外結(jié)構(gòu)域組成。 其中，胞外結(jié)構(gòu)域與小鼠具有94%的氨基酸序列同一性，與牛、犬、馬、貓、人、豬和恒河猴具有69-76%的序列同一性。該26kDa的II型跨膜蛋白在胞內(nèi)組裝形成非共價(jià)連接的同源三聚體。復(fù)合體的結(jié)合可誘導(dǎo)反向信號(hào)傳導(dǎo)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞共刺激，減弱單核細(xì)胞的應(yīng)答。 膜結(jié)合型TNF-α經(jīng)TACE/ADAM17裂解可釋放出55kDa的可溶性TNF-α三聚體。TNF-α與泛表達(dá)的TNF RI和造血細(xì)胞限制性的TNFRII結(jié)合。TNF RI和TNF RII均以同源三聚體形式表達(dá)。TNF-α通過(guò)控制細(xì)胞凋亡從而調(diào)節(jié)淋巴組織的發(fā)育。TNF-α還可通過(guò)誘導(dǎo)活化血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞促進(jìn)炎癥反應(yīng)應(yīng)答。TNF-α是多種炎癥性疾病發(fā)展中的一個(gè)關(guān)鍵性細(xì)胞因子，國(guó)外大量報(bào)道提示TNF-α可能是胰島素抵抗發(fā)病機(jī)制中的重要中介環(huán)節(jié)。體內(nèi)及體外試驗(yàn)均證明TNF-α可干擾周?chē)M織胰島素作用致胰島素抵抗。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué);微生物學(xué);癌癥生物學(xué);心血管生物學(xué);神經(jīng)科學(xué);代謝生物學(xué);
